前言

近日，健合集团创新研究中心联合江南大学在国际权威期刊《Beneficial Microbes》上发表了其最新母乳研究成果，该研究深度揭示了不同泌乳阶段母乳中的菌落组成和结构变化，并率先在种水平完成母乳中乳酸杆菌和双歧杆菌的全面分析。

主要结论

不同泌乳阶段的母乳菌群组成存在差异，初乳菌群构成与第一阶段过渡乳相似，与第二阶段过渡乳和成熟乳不同。在属水平，Blautia（布劳特氏菌属）、Ruminococcus（瘤胃球菌属）、Dorea（多尔氏菌属）等在不同泌乳阶段丰度具有显著差异。在种水平，反刍双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌婴儿亚种、粘膜乳杆菌、瘤胃乳杆菌分别是母乳中主要的双歧杆菌和乳杆菌。此外，母乳低聚糖LNnT含量与母乳中长双歧杆菌丰度显著正相关。

研究方法

该研究收集了来自广州地区18位健康产妇产后第2-4天、第8天、第14天、第30天不同阶段的母乳样品共60份，分析不同泌乳阶段母乳中23种低聚糖含量的变化，并运用 16s rRNA V3-V4 区高通量测序，解析母乳中菌群的总体情况。在此基础上，使用乳杆菌、双歧杆菌GroEL特异性基因进行测序，从种水平，追踪并分析母乳中乳杆菌和双歧杆菌的群落组成、多样性与动态变化。

研究结果

1. 不同泌乳阶段母乳菌群多样性不同，菌群结构改变

从图1A可以看出，与成熟乳相比，初乳和第一阶段过渡乳的菌群α多样性更低。此外（图1B），与第二阶段过渡乳以及成熟乳相比，初乳和第一阶段过渡乳中菌群组合明显不同。

图1（A）不同泌乳阶段Alpha多样性；

（B）不同泌乳阶段Beta多样性

注：colostrum：第2-4天收集的初乳；transition 1：第8天收集的过渡乳；transition 2：第14天收集的过渡乳；mature：第30天收集的成熟乳；*与成熟乳相比、#与transition2相比

2. 不同泌乳阶段母乳菌群在属水平上存在显著差异

进一步在属水平分析母乳中的菌群构成，母乳样本中丰度最高的前10个菌属分别是大肠埃希菌.志贺菌属、葡萄球菌属、芽孢杆菌属、双歧杆菌属、栖粪杆菌属、未分类的毛螺菌科、瘤胃球菌属、真细菌属、不动杆菌属以及未分类的肠杆菌科。

此外，由图2B-F可见，不同泌乳阶段母乳中的多种菌属丰度具有显著差异。其中，初乳和第一阶段过渡乳中Blautia丰度显著低于成熟乳；第一阶段过渡乳中Ruminococcus、Escherichia-Shigella、Dorea、 Ruminococcaceae菌属丰度显著低于成熟乳；此外，尽管时间跨度很短，第一阶段过渡乳中的Dorea丰度也显著低于第二阶段过渡乳。

图2 （A）属水平丰度前50菌群组成；

（B-F）不同泌乳阶段具有显著差异的菌属

3. 母乳中的双歧杆菌多样性和组成

进一步从种水平深度分析母乳中的双歧杆菌种水平多样性及其在不同泌乳时期的组成与动态变化。如图3A，共有12种双歧杆菌在不同泌乳阶段的母乳样本中检出，主要包括反刍双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌婴儿亚种等。其中，两歧双歧杆菌在第一阶段过渡乳中的丰度显著低于成熟乳，而假小链双歧杆菌在第一阶段过渡乳中的丰度显著高于成熟乳。

此外，双歧杆菌多样性和组成在不同泌乳阶段并没有显著差异。值得注意的是，本研究对初乳中的23种低聚糖含量和双歧杆菌丰度进行相关性分析，结果显示LNnT含量与长双歧杆菌丰度显著正相关，包括长双歧杆菌婴儿亚种和长双歧杆菌长亚种。已有研究证明长双歧杆菌婴儿亚种能够利用多种不同类型的母乳低聚糖，包括LNnT，因此这也提示了初乳中更高含量的低聚糖可能促进关键双歧杆菌的生长。

图3 （A）不同泌乳阶段母乳中双歧杆菌组成；

（B）不同泌乳阶段丰度具有显著差异的双歧杆菌

4. 母乳中的乳杆菌多样性和组成

另外，从种水平对母乳中的乳杆菌种水平多样性及其在不同泌乳时期的组成与动态变化进行深度分析。结果如图4，共有21种乳杆菌在不同泌乳阶段的母乳样本中检出，主要包括粘膜乳杆菌、瘤胃乳杆菌、唾液联合乳杆菌、罗伊氏唾液乳杆菌等。此外，与双歧杆菌的结果相似，乳杆菌多样性和组成在不同泌乳阶段并没有显著差异。

图4 （A）不同泌乳阶段乳杆菌alpha多样性指数；

（B）不同泌乳阶段乳杆菌beta多样性指数；

（C）乳杆菌物种组成

总结

受限于母乳中微生物的低生物量，目前较少有研究从种水平分析母乳中双歧杆菌组成。本研究联合江南大学益生菌研究平台率先测定不同泌乳阶段母乳中双歧杆菌和乳杆菌的组成和动态变化，揭示了不同泌乳时期母乳菌群在属水平和种水平均存在显著差异，为乳源性益生菌的研究和开发提供了重要的科学依据。

参考文献：

[1] Ding M, Zheng Y, Liu F, Tian F, Ross RP, Stanton C, Yu R, Zhao J, Zhang H, Yang B, Chen W. Lactation time influences the composition of Bifidobacterium and Lactobacillus at species level in human breast milk. Benef Microbes. 2022 Oct 4;13(4):319-330. doi: 10.3920/BM2021.0119. Epub 2022 Aug 18. PMID: 35979712.